血培養(yǎng)（bloodculture），是種將新鮮離體的血液標本接種于營養(yǎng)培養(yǎng)基上，在定溫度、濕度等條件下，使對營養(yǎng)要求較高的細菌生長繁殖并對其進行鑒別，從而確定病原菌的種人工培養(yǎng)法。選用血培養(yǎng)作為診斷試驗的最重要目的是，要確診患者細菌血癥或真
血培養(yǎng)（blood culture），是種將新鮮離體的血液標本接種于營養(yǎng)培養(yǎng)基上，在定溫度、濕度等條件下，使對營養(yǎng)要求較高的細菌生長繁殖并對其進行鑒別，從而確定病原菌的種人工培養(yǎng)法。
選用血培養(yǎng)作為診斷試驗的最重要目的是，要確診患者細菌血癥或真菌血癥，以及后續(xù)的病原菌鑒定和測抗菌藥物的敏感譜。
血培養(yǎng)指征
可疑細菌感染患者出現(xiàn)以下任一指征時，應采集血培養(yǎng)：
1.體溫＞38℃或＜36℃
2.寒戰(zhàn)
3.外周血 WBC 增多（>10.0×109/L，核左移時）或減少（<4.0×109/L)
4.呼吸頻率＞20次／ min ，或動脈血PaCO2<32mmHg
5.心率＞90次／ min
6.血壓降低7．皮膚粘膜出血
8.昏迷
9.多器官功能障礙
10.炎癥指標如 CRP 、降鈣素原（ PCT )、1,3-3-D葡聚糖（ G 試驗）升高等
采集時機
要求
- 對懷疑菌血癥患者，在考慮使用抗菌藥物之前（藥物醫(yī)囑執(zhí)行前），應立即開立化驗單、采集血培養(yǎng)標本
- 對于剛?cè)朐旱奈Ｖ馗腥净颊撸催M行抗菌藥物治療之前，即使體溫不高，也應及時采集血培養(yǎng)
- 除特殊情況之外，采取血培養(yǎng)后2-5天內(nèi)，無需重復采取血培養(yǎng)
說明
- 寒戰(zhàn)或發(fā)熱初起時采集。盡可能在寒和發(fā)熱初起30分鐘﹣1小時內(nèi)采集血標本，此時血流中病原菌濃度最高
- 不同時間點多次采血，只有在疑似連續(xù)性菌血癥時才有必要，如感染性心內(nèi)膜炎或其他血管內(nèi)感染（如導管相關感染）
血培養(yǎng)標本采集消毒程序
- 皮膚消毒：嚴格執(zhí)行三步法（防止皮膚定植菌、過路菌污染）
1．用75％酒精擦拭靜脈穿刺部位待干30秒以上。
2．然后用1%-2％碘酊作用30秒或10％碘伏作用60秒，從穿刺點向外畫圈消毒，至消毒區(qū)域直徑達3cm以上。
3．最后用75％酒精脫碘，待酒精揮發(fā)干燥后采血。
- 新生兒及對碘過敏的患者，只能用75％酒精消毒60s，待穿刺部位酒精揮發(fā)干燥后穿刺采血
1．用75％酒精消毒血培養(yǎng)瓶橡皮塞，作用60秒自然干燥后，然后注入。
2．不能用含碘消毒液。
血培養(yǎng)標本采集注意事項
要求
- 嚴格無菌操作，不允許在皮膚消毒后用手按壓靜脈，除非帶有無菌手套
- 不推薦采血和接種血培養(yǎng)瓶更換注射器針頭，采用真空采血裝置能降低污染率
說明
- 無論采用何種采血方法，血培養(yǎng)可接受的污染率通常是≤3%
- 研究表明，經(jīng)過專門培訓的熟練抽血者采集血培養(yǎng)的污染率為3%，而未經(jīng)培訓的住院醫(yī)生和護士污染率則達11%
- 對護士就血培養(yǎng)標本采集進行專門、嚴格的培訓是非常必要的
采集部位
- 從兩側(cè)上肢靜脈（肘靜脈）采血
- 疑似左側(cè)感染性心內(nèi)膜炎，采集肘動脈或股動脈更好
- 不建議常規(guī)采集動脈血，其診斷價值不比靜脈血更大
- 嚴禁從靜脈三通處肝素帽取下后采集血培養(yǎng)標本
- 常規(guī)血培養(yǎng)不宜從血管留置導管或血管留置裝置中采集，除非懷疑或需要排除導管相關血流感染
血管內(nèi)導管標本
1.經(jīng)導管采血培養(yǎng)
- 留置導管采血培養(yǎng)只是在評估導管感染時需要．應由導管近端嚴格消毒后經(jīng)穿刺抽取血液
- 同時須抽另一側(cè)外周靜脈血進行另外一套血培養(yǎng)
2.導管末端培養(yǎng)（拔除導管）
- 75％乙醇消毒導管周圍皮膚，拔出整條導管后用無菌剪刀取下體內(nèi)段末端約5cm長度，置于無菌容器中送檢
- 如不能作床旁接種，可將導管置含有少量生理鹽水的無菌試管內(nèi)送檢
- 不應將剪下的導管體內(nèi)段置肉湯增菌液增菌，導致假陽性
導管標本的實驗室處理
- 實驗室應將體內(nèi)段導管立即置血平上作滾動涂布接種，置35℃培養(yǎng)8~24h，觀察有無細菌生長
- 如細菌菌落數(shù)≥15 CFU / Tip 即為陽性，則認為血流感染是可能與導管有關
- 繼發(fā)性導管相關感染，常見于原發(fā)感染灶釋放入血或透過腸粘膜屏障入血，細菌在導管腔內(nèi)壁粘附生長更常見，滾動涂布接種可能陰性。須在無菌生理鹽水超聲震蕩后取震蕩液培養(yǎng)
采集套數(shù)
- 同時或間隔短時間內(nèi)采集2套，即"雙瓶雙側(cè)”（每套包括1只普通血培養(yǎng)瓶及1只厭氧血培養(yǎng)瓶）
- 研究表明，血培養(yǎng)2套和3套的檢出率顯著高于只做1套的檢出率
- 至少“雙側(cè)兩瓶”，即從一個部位采血接種一個需瓶，再從另一部位采血接種另一個厭氧瓶
- 一次靜脈采血注入到多個培養(yǎng)瓶中應視為單個血培養(yǎng)
采血量及標本運送
采血量
- 自動化血培養(yǎng)儀要求成人8-10ml／瓶，兒童1-5mI／瓶
- 成人血培養(yǎng)采血量在2~30m之間，病原菌檢出率與采血量成正比例
- 每增加1ml的血液，病原菌的檢出率大約增加3.2%,假陽性也有可能隨之提高
- 兒童患者因為血液中病原菌濃度較高，采血量不需與成人等同
- 血液病患者或者血容量相對較低患者，建議使用兒童瓶來減少血液的采集量、增加病原菌的檢出率
- 當采血量少于推薦值時，必須首先滿足需氧瓶，將剩余血接種入?yún)捬跗?/li>
采集后立即送微生物實驗室放入培養(yǎng)箱，最好1h內(nèi)
否則，應20-25C室溫保存，原則上也不應超過12小時，切勿冷藏
血培養(yǎng)的報告周期
- 95%-97％的有臨床價值的細菌會在3-4天內(nèi)被自動血培養(yǎng)系統(tǒng)檢出，目前仍推薦5天的培養(yǎng)周期
- 其實絕大多數(shù)細菌在24小時內(nèi)陽性報警，真菌相對延緩一天，3-5天出最終報告
- 自動化血培養(yǎng)儀的標準血培養(yǎng)周期為5天特殊情況可適當延長培養(yǎng)時間
- 如臨床懷疑布魯菌感染，可延長培養(yǎng)至28天等
建議
1．當血培養(yǎng)至24 h 后仍為陰性，不考慮革蘭陰性菌感染，針對 G ＋進行選擇用藥；
2．當血培養(yǎng)至48 h 后仍為陰性而臨床感染癥狀明顯，高度懷疑為念珠菌性血流感染；
3．當血培養(yǎng)72 h 后仍為陰性，而患者臨床表現(xiàn)良好，可停止應用抗菌藥物。
